Chromatrap, eine business unit von Porvair Sciences kündigt ein neues patentiertes Protokoll, das in der Lage ist, um einfach, schnell und effizient bereichern Transkriptionsfaktoren aus Nativen Chromatin.
Nativen Chromatin-Immunopräzipitations – (N-ChIP) ist eine alternative zur herkömmlichen cross-linked (X-ChIP), die beseitigt die Notwendigkeit für die Fixierung von Zellen mit Formaldehyd vor der Extraktion. Als Folge werden die Zellen bleiben in einem mehr natürlichen ‚Urzustand‘. Die DNA/protein-Fragmente selektiv immunoprecipitated mit Antikörpern gegen das protein von Interesse und die daraus resultierenden Brüche behandelt, um getrennte DNA-und protein-Komponenten. Native-ChIP ist die Technik der Wahl für die Untersuchung der Histon-Modifikatoren und bestimmte vorkommende Transkriptionsfaktoren sind wahrscheinlich gebunden an DNA.
Traditionell Native ChIP-assays, die an fünf zentralen zeitraubende Arbeitsschritte: Vorbereitung von chromatin analysiert werden, die aus Zellen, Immunpräzipitation chromatin-Strukturen mit einer hohen Qualität ChIP-validierten Antikörper, spezifisch an das target-protein ; Trennung der ausgefällten chromatin-Fragmenten, DNA-Rückgewinnung aus dem ausgefällten Produkt und schließlich die DNA-Analyse.
Der Chromatrap® N-ChIP-kit bietet eine neue, schnellere, einfachere und effizientere Art und Weise der Durchführung der N-ChIP-assays (Patent-Nr. GB2482209). Es verwendet Scheiben aus einem inerten, porösen, Polymeren, an die Protein A-oder Protein G wurde kovalent an maximieren Sie die Effizienz der Erfassung der Ziel-chromatin/Antikörper-komplexe.
Im Gegensatz zu anderen Ansätzen der Chromatrap® N-ChIP-kit beseitigt die Verwendung von agarose-oder magnetische beads, die in mehr Probe beibehalten wird, die während der Extraktion. Zusätzlich Chromatrap® N-ChIP-Technologie erhöht die Affinität der Antikörper-Bindung an Antigene, die auf Nativen chromatin, die als Peptide sind leichter zugänglich. Als Ergebnis der Chromatrap® N-ChIP-kit setzt einen neuen standard für die Bereicherung Transkriptionsfaktoren aus Nativen Chromatin.