Einfaches und Effizientes Protokoll für die Native Chromatin Immunpräzipitation

Chromatrap, eine business unit von Porvair Sciences kündigt ein neues patentiertes Protokoll, das in der Lage ist, um einfach, schnell und effizient bereichern Transkriptionsfaktoren aus Nativen Chromatin.

Nativen Chromatin-Immunopräzipitations – (N-ChIP) ist eine alternative zur herkömmlichen cross-linked (X-ChIP), die beseitigt die Notwendigkeit für die Fixierung von Zellen mit Formaldehyd vor der Extraktion. Als Folge werden die Zellen bleiben in einem mehr natürlichen ‚Urzustand‘. Die DNA/protein-Fragmente selektiv immunoprecipitated mit Antikörpern gegen das protein von Interesse und die daraus resultierenden Brüche behandelt, um getrennte DNA-und protein-Komponenten. Native-ChIP ist die Technik der Wahl für die Untersuchung der Histon-Modifikatoren und bestimmte vorkommende Transkriptionsfaktoren sind wahrscheinlich gebunden an DNA.

Traditionell Native ChIP-assays, die an fünf zentralen zeitraubende Arbeitsschritte: Vorbereitung von chromatin analysiert werden, die aus Zellen, Immunpräzipitation chromatin-Strukturen mit einer hohen Qualität ChIP-validierten Antikörper, spezifisch an das target-protein ; Trennung der ausgefällten chromatin-Fragmenten, DNA-Rückgewinnung aus dem ausgefällten Produkt und schließlich die DNA-Analyse.

Der Chromatrap® N-ChIP-kit bietet eine neue, schnellere, einfachere und effizientere Art und Weise der Durchführung der N-ChIP-assays (Patent-Nr. GB2482209). Es verwendet Scheiben aus einem inerten, porösen, Polymeren, an die Protein A-oder Protein G wurde kovalent an maximieren Sie die Effizienz der Erfassung der Ziel-chromatin/Antikörper-komplexe.

Im Gegensatz zu anderen Ansätzen der Chromatrap® N-ChIP-kit beseitigt die Verwendung von agarose-oder magnetische beads, die in mehr Probe beibehalten wird, die während der Extraktion. Zusätzlich Chromatrap® N-ChIP-Technologie erhöht die Affinität der Antikörper-Bindung an Antigene, die auf Nativen chromatin, die als Peptide sind leichter zugänglich. Als Ergebnis der Chromatrap® N-ChIP-kit setzt einen neuen standard für die Bereicherung Transkriptionsfaktoren aus Nativen Chromatin.

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